Asistente de analista después de dejar la escuela, Dakin fue aprendiz del analista de la ciudad de Leeds, Sr. T. Fairley. Permaneció en el laboratorio de Fairley durante cuatro años y en la vida posterior atribuyó una gran importancia a la experiencia que adquirió allí.
Sin embargo, a pesar de las largas jornadas laborales, encontró tiempo para convertirse en pescador. Una de sus vacaciones en años posteriores la pasó pescando en Irlanda con su amigo, Harold Dudley. Dakin se inclinó a trazar una conexión entre este período en el laboratorio de Fairley y su interés posterior por la bioquímica, debido a la experiencia que obtuvo de los muchos análisis de agua, alimentos y fertilizantes que se le presentaron, así como de los exámenes realizados para un número de venenos.
De hecho, admitió que se había deleitado con libros de jurisprudencia médica; pero afirmó que todo esto le había ayudado a darse cuenta de que la química tenía un lado biológico.
En sus últimos días, Dakin se hizo amigo de Sir Gowland Hopkins, F.R.S., y a menudo compararon sus primeras experiencias, ya que habían sido muy similares. Hopkins también pasó muchos de sus primeros años como analista y también estuvo estrechamente asociado con Sir Thomas Stevenson, el Analista de Gobierno.
El siguiente paso de Dakin, en octubre de 1898, fue el antiguo Yorkshire College en Leeds, entonces un colegio constitutivo de la Universidad Federal de Victoria, donde comenzó su asociación con el profesor J. B. Cohen. Sin duda, el período tuvo una poderosa influencia formativa en la carrera de Dakin.
Un contemporáneo, que había estado con Dakin en Fairley's, y al mismo tiempo asistía al Yorkshire College, lo recuerda entonces como un hombre alto, delgado y estudioso dedicado a su trabajo, y especialmente a sus investigaciones. Mostró poco interés en los juegos o en la Unión de Estudiantes, pero sin embargo era un buen mezclador y popular entre sus contemporáneos.
Incluso entonces, se le consideraba probablemente el miembro más brillante de la escuela de química que entonces estaba fundando Cohen, y los dos se hicieron grandes amigos. Tenían muchos intereses en común y Dakin fue, durante muchos años, un miembro bienvenido del grupo que se entretenía cada verano en la cabaña de Cohen en el lago Coniston.
En el laboratorio, Cohen estaba muy interesado y se dedicó afanosamente a estudios sobre la sustitución en el núcleo de los hidrocarburos aromáticos y especialmente sobre la influencia del par aluminio-mercurio en este fenómeno. Dakin participó activamente en este trabajo, extendiéndolo hasta la entrada de los halógenos en el núcleo aromático.
Cohen también estaba muy interesado en la actividad óptica y aquí nuevamente Dakin participó activamente en el trabajo. De este período, de hecho, se puede fechar el interés permanente de Dakin en la actividad óptica de las sustancias de interés biológico, su relación con su aparición y modos de formación, las condiciones bajo las cuales se logró y mantuvo la asimetría, y su influencia en la actividad biológica. Estos diversos aspectos de la actividad óptica forman un tema que se puede rastrear a través de gran parte del trabajo de Dakin.
Cohen, por su parte, reconoció en Dakin a un alumno de excepcional mérito y experiencia; y después de la graduación de Dakin como B.Sc. en 1901 permaneció un año más como asistente personal de Cohen y demostrador no oficial en el laboratorio. Cohen fue un escritor voluminoso y Dakin participó muy activamente en la publicación de algunos de sus tratados, hecho que Cohen reconoce con gratitud en varios prefacios.
Esta experiencia literaria fue de gran valor para Dakin en los años posteriores, cuando la dirección editorial de una importante revista se convirtió en parte de su vida diaria. De todos los libros de Cohen, probablemente el más conocido es su pequeña "Química orgánica práctica", que debe haber sido utilizado por innumerables estudiantes. Según el rumor entonces corriente, los detalles de cada preparación descrita en la última edición de este conocido libro habían sido elaborados por Dakin, y los "rendimientos" mostrados eran, en cada caso, los que había obtenido.
Hasta qué punto Dakin fue realmente responsable de toda la riqueza de la descripción detallada dada en este libro, no se puede estimar ahora; pero muchos de los estudiantes que trabajaban en el laboratorio en ese momento recuerdan con gratitud la ayuda que él personalmente les brindó, no solo en la preparación de sustancias orgánicas, sino también en el uso de muchos aparatos químicos y en las operaciones involucradas en los análisis de combustión. determinación del peso molecular y estimación de varios elementos en compuestos orgánicos.
No se puede evaluar hasta qué punto había adquirido el conocimiento a través de su experiencia en el laboratorio de Fairley, y cuánto le llegó a través de su contacto íntimo diario con Cohen; pero Dakin era, en cualquier caso, un hombre que podía "hacer cosas", y que "sabía", y en cuyas manos las reacciones y operaciones como las síntesis parecían "ir".
Se tomó un sinfín de problemas para transmitir a otras técnicas que había aprendido y en las que se había convertido en un experto; todos los que fueron sus contemporáneos en el laboratorio de Cohen reconocen que su presencia allí era una parte esencial de su carácter, y que los principiantes siempre acudían a él en busca de ayuda y orientación; y hay muchos hoy que aprecian con gratitud el recuerdo de esa experiencia. Dakin parecía considerarse a sí mismo como alguien que había sido un afortunado receptor de experiencias y amistades negadas a los demás, y esto lo convertía, por contactos personales e individuales, en un maravilloso maestro con una paciencia inagotable.
Su interés por las técnicas y los métodos nunca decayó.
Dakin fue galardonado con una Exposición de 1851 en 1902 y esperaba con gran interés esta oportunidad de continuar sus investigaciones en el extranjero, pero una serie de accidentes parecía probable, en algún momento, para evitar que su ambición se hiciera realidad. Su plan de trabajar con el antiguo maestro de Cohen, von Pechmann, fue impedido por la muerte de este último, y un plan que tenía para ir a ver a Duclaux, en el Instituto Pasteur, tuvo que ser abandonado debido a la enfermedad de Duclaux.
No se aceptó una invitación para continuar con 'The Pasteur" y trabajar con otros científicos y, finalmente, por sugerencia de Sir Henry Roscoe (que entonces era el presidente del Consejo de Administración del Instituto Lister), Dakin fue al laboratorio de SG Hedin hasta que su ambición de trabajar en el extranjero se hizo realidad gracias a la oferta de una oportunidad de Kossel en Heidelberg. Allí, Dakin trabajó con Kossel en las protaminas y compartió el descubrimiento de la arginasa. Posteriormente, Dakin regresó a Inglaterra y a un período de trabajo muy fructífero en el Instituto Lister, donde completó el mandato de la Exposición de 1851.
En 1905, Dakin conoció al Dr. Christian A. Herter, quien había fundado un laboratorio privado en los pisos superiores de su casa en Madison Avenue en Nueva York, y Dakin aceptó la invitación de Herter para trabajar allí. Este fue, quizás, el paso más importante de toda su carrera; permaneció con Herter hasta que este falleció, y en los Estados Unidos por el resto de su propia vida.
Cuando el Dr. Herter murió en 1910, Dakin permaneció a cargo del laboratorio a petición de su viuda.
En 1916, Dakin y la Sra. Herter se casaron y dos años más tarde los Dakin se mudaron a una hermosa casa de campo en Scarborough-on-Hudson. El laboratorio se restableció en un edificio separado de la finca y aquí, con la ayuda de un técnico fiel, continuó durante el resto de su vida, en las condiciones más favorables a su temperamento jubilado descritas como de una "perfección y elegancia sin prisas". Su matrimonio le trajo una gran felicidad y la muerte de la señora Dakin en 1951, después de una larga enfermedad, que había supuesto para su marido un largo período de angustia y ansiedad, puso demasiado estrés en la menguante reserva de fuerzas de Dakin, por lo que murió aproximadamente un año después.
Aunque Dakin residió durante tanto tiempo en los Estados Unidos, conservó su nacionalidad británica y su devoción por este país nunca vaciló. Sus visitas a Inglaterra fueron, en un tiempo, frecuentes y muy esperadas y disfrutadas.
Cuando estalló la guerra en 1914, Dakin, aunque su salud no era buena, vino a Inglaterra y ofreció sus servicios. Las autoridades no pudieron encontrarle un empleo apropiado en ese momento y regresó a Estados Unidos. Sin embargo, pronto regresó a Europa, después de haber sido invitado por el Dr. Flexner del Instituto Rockefeller para cooperar en una investigación sobre el tratamiento de heridas infectadas que había sido iniciada en Francia por el difunto Alexis Carrel.
El trabajo experimental se estaba llevando a cabo en un hospital para heridos franceses en Compiegne.
Allí, en cooperación con cirujanos militares franceses, Dakin desarrolló la solución tamponada de hipoclorito que lleva su nombre. Describió la historia de los hipocloritos y la mejor manera de preparar esta "solución de Dakin" en dos artículos del British Medical Journal y uno en una publicación francesa, de modo que el método correcto de preparación debería ser lo más conocido posible.
Solución de Dakin
Es interesante que, en su revisión, Dakin mencione las cloraminas, el trabajo previo de Cohen sobre estas y sus aplicaciones y limitaciones. La investigación de los valores desinfectantes de estos también, en cooperación con Dufresne, Cohen y Kenyon, se publicó posteriormente, y este parece ser el último artículo en el que aparecen juntos los nombres de Cohen y Dakin.
Un poco más tarde, Dakin se llenó de alegría al recibir la invitación que había estado esperando para ayudar en el esfuerzo británico en los Dardanelos.
Gracias a sus esfuerzos, el gran Cunarder, Aquitania, que se había convertido en un barco hospital, fue equipado con un tanque especial para la electrólisis continua del agua de mar, mediante el cual se disponía de un suministro ilimitado de una solución desinfectante de hipoclorito adecuada. Fue un placer para uno de sus antiguos colaboradores informar a Dakin, en 1946, cuando el viejo y galante barco se acercaba al final de su carrera, que todavía llevaba el tanque electrolítico original utilizado en la campaña de los Dardanelos, y que su el oficial médico todavía estaba orgulloso de la eficacia de la solución desinfectante que seguía proporcionando.
Otra visita que se recuerda se realizó a este país en 1936, cuando Dakin recibió un título honorífico (LL.D.) por su antigua Universidad.
Este honor le proporcionó una satisfacción peculiar, ya que le permitió visitar los escenarios y triunfos de su juventud. Fue presentado por el Profesor de Medicina, Dr. Collinson, quien se refirió al trabajo de Dakin y su asociación con Cohen, su elección para la Exposición de 1851, sus contribuciones a la bioquímica y, especialmente, a la medicina, la terapéutica y el control de enfermedades.
El profesor Collinson describió a Dakin como el estudiante más brillante de su época en el Departamento de Química y relató cómo la medicina se había desarrollado gracias al esfuerzo científico y la investigación del químico, cómo Dakin había hecho contribuciones tan notables en este campo y cómo la solución de Dakin había sido desarrollada, salvando cientos de vidas y miles de extremidades. También hizo una referencia al trabajo más reciente de Dakin, con West, sobre la anemia perniciosa.
Al revisar el trabajo de Dakin para la bioquímica, uno se sorprende inmediatamente por la variedad y variedad de temas a los que, en un momento u otro, prestó atención. A veces es difícil situar su contribución en la perspectiva adecuada porque gran parte de ella se ha convertido ahora en parte de la base aceptada de la bioquímica y se ha incorporado a su tejido.
Así, sus primeros trabajos aparecieron en el Zeitschrift fur Analytische Chemie y debieron haber sido enviados para su publicación cuando tenía poco más de veinte años, durante su período de aprendizaje en el laboratorio del Sr. Fairley. Les sigue una serie de artículos en las Transactions of the Chemical Society que incorporan los resultados de su trabajo en el laboratorio de Cohen.
Dakin estaba acostumbrado a señalar que las investigaciones en el laboratorio de Cohen en ese momento brindaban oportunidades al principiante para adquirir nuevas técnicas y nuevos enfoques a un problema; con frecuencia brindaron la oportunidad de aprender cómo se puede determinar la constitución de sustancias orgánicas, qué criterios de pureza deben exigirse y cómo se sintetizan varios compuestos nuevos.
Los siguientes artículos de Dakin provienen del laboratorio de Kossel en Heidelberg y del Instituto Lister en Londres y representan el trabajo que hizo como expositor de 1851.
Con Kossel descubrió la arginasa y además estuvo relacionado, principalmente, con las protaminas que entonces eran, y todavía son, consideradas como las formas más simples de proteínas.
Hedin, que entonces trabajaba en "the Lister", ya tenía el descubrimiento de la arginina a su nombre, y Dakin trabajó en su laboratorio durante un tiempo.
Dakin siempre había estado interesado en las enzimas y su entusiasmo por esta rama de estudio —ahora es una disciplina científica separada por derecho propio— era tan evidente para sus amigos, que todos en su círculo íntimo lo conocieron con el sobrenombre de "Zyme" que Cohen le había otorgado por primera vez en los días de su estrecha asociación.
Mientras estaba en el Instituto Lister y tras una investigación que produjo soamigdalina como resultado de la hidrólisis fraccionada del ácido amigdalínico, parece haber sido el primero en demostrar la especificidad estereoquímica de las enzimas en su estudio de la acción de las esterasas sobre los ésteres de ácido mandélico; así lo llevó a imaginarse el primer paso en la hidrólisis de ésteres como una combinación con la enzima. Esto representó un avance en la observación y la teoría de primera importancia en relación con el estado de nuestro conocimiento del modo de acción de las enzimas en ese momento. Dakin volvió más tarde al estudio de las enzimas del hígado con Wakeman y, más tarde, descubrió la glioxalasa con Dudley.
Fue mientras Dakin estaba en el Instituto Lister cuando desarrolló su trabajo sobre la actividad fisiológica de sustancias relacionadas con la adrenalina.
En ese momento, la estructura de la adrenalina no se había establecido finalmente y Dakin preparó y examinó una serie de derivados y sustancias análogas. No reclama ninguna prioridad y, en ese momento, parece haber estado más interesado en la actividad fisiológica de ciertos grupos. No hay duda, sin embargo, de que fue uno de los que sintetizó adrenalina en esa época y lo confirmó con la constitución más probable que se le había sugerido.
El interés de este trabajo para los contemporáneos de Dakin le abrió nuevos caminos: el aparato requerido para el estudio de sus compuestos fue ensamblado hace medio siglo por el Dr. (ahora Sir) Charles Martin. Dakin solicitó la ayuda de Elliott (entonces en Cambridge) y de Leathes y, cuando su trabajo estuvo terminado, Starling lo presentó a la Royal Society. El documento fue uno de los primeros de su tipo y, cuando se presentó por primera vez, fue muy apreciado.
Poco después de haber iniciado su trabajo en el laboratorio de Herter, apareció en el primer volumen de la Revista de química biológica el primer artículo que trataba de aquellos temas con los que el nombre de Dakin está inseparablemente conectado —el estudio del metabolismo intermedio de los aminoácidos y los ácidos grasos—. en 1906.
El artículo está fechado como recibido del laboratorio de Herter en noviembre del año anterior y, en vista del tema y de la estrecha asociación posterior de Dakin con esta revista, la ocasión es de un interés casi histórico.
Quizás el rasgo más llamativo, a la vista de la época, de este intento de estudiar el metabolismo intermedio de sustancias químicas simples, especialmente de ácidos grasos y aminoácidos, fue la introducción de un método de oxidación que se caracterizaba por su suavidad, comparado con los vigorosos métodos químicos que entonces eran de uso común. Dakin introdujo peróxido de hidrógeno, actuando en presencia de un rastro de hierro agregado a la mezcla como rastro de sulfato ferroso. A veces, la mezcla se calentaba, como observó el propio Dakin; en otros, se aplicó un calor suave.
En sus primeros experimentos, descubrió que se formaban amoníaco, dióxido de carbono y productos volátiles. Describe la aplicación del método a la oxidación de leucina en la que notó el olor a acetaldehído. Se dejó reposar la mezcla durante la noche y luego se identificaron los productos de la reacción mediante una destilación de toda la mezcla, luego se acidificó el residuo y se repitió la destilación, y finalmente se alcalinizó el residuo y se destiló de nuevo. Este estudio de la acción del peróxido de hidrógeno fue obviamente susceptible de una extensión casi indefinida. Entre otras cosas, Dakin pudo demostrar que cuando los ácidos grasos se descomponen se eliminan dos átomos de carbono a la vez: demostró que los ácidos benzoico y fenilacético eran los productos finales de la reacción cuando se oxidaban sustancias análogas, que originalmente contenían un número par o impar de átomos de carbono en la parte de la cadena lateral del ácido graso.
En este trabajo se encontraron con frecuencia cetonas y aldehídos y Dakin demostró que la acetona y la acetofenona se convertían en ácidos acético y benzoico por oxidación en el cuerpo vivo o por oxidación con peróxido de hidrógeno in vitro.
Encontró que todos los ácidos grasos de la serie acética se oxidaban fácilmente con el peróxido de hidrógeno e hizo la interesante observación de que los miembros inferiores de la serie se oxidaban más fácilmente que aquellos con una cadena más larga de átomos de carbono. Hizo un estudio particularmente completo de esta serie y de sus derivados simples que probablemente se encontrarán en estudios metabólicos y de la oxidación de toda una serie de derivados fenílicos de ácidos grasos.
Dakin estudió la formación de ácido glicólico y trabajó en la reacción del ácido glioxílico; investigó la acción de muchas enzimas sobre una variedad de sustancias en diferentes condiciones y, en sus estudios sobre la oxidación de sustancias simples, incluyó los derivados del ácido benzoico y la tirosina y se interesó por la naturaleza química de la alcaptonuria. También investigó la absorción de isómeros ópticos por ingestión y estudió los efectos del tejido muscular en una variedad de sustancias. De hecho, Dakin trabajó en muchos campos y en una gran diversidad de temas y aportó adorno y distinción a todos ellos.
Dakin no solo pudo rastrear los cambios como resultado de reacciones químicas in vitro; disponía también de amplias facilidades para investigar el destino de muchas sustancias de interés biológico después de su administración a los animales; o, como él mismo lo expresó, por ver si era posible emular in vitro algunas de las reacciones que se sabía que ocurren in vivo.
Se puede mencionar que Dakin no solo pudo realizar experimentos en animales normales, sino que parte de su trabajo posterior fue realizado, ya sea por él mismo o en cooperación con uno de sus colegas, en perros glicosúricos y por perfusión de órganos aislados a los que se podrían añadir al fluido de perfusión sustancias de composición química conocida, y estudiarlas.
Era bien sabido, por ejemplo, que el cuerpo podía convertir fácilmente cualquiera de los ácidos grasos en dióxido de carbono y agua, pero no se sabía cómo se efectuaba este cambio. Unos años antes de la aparición del primer artículo de Dakin, sin embargo, Knoop había adelantado su hipótesis de oxidación en el átomo de carbono y el trabajo y los resultados de Dakin, llevados a cabo poco después, proporcionaron mucho apoyo a esta concepción e hicieron mucho para establecer el principio de ft oxidación. Hasta ese momento, la mayor parte del trabajo en el que se basaba la hipótesis se había realizado en animales, y Dakin pudo demostrar que el proceso podría ser imitado por la acción del peróxido de hidrógeno in vitro.
El trabajo de Dakin sobre el efecto de los álcalis en las propiedades de las proteínas ha ampliado nuestro conocimiento de la estructura de la molécula de proteína intacta y se ha aplicado al estudio de la especificidad inmunológica. El trabajo comenzó con una observación de Dakin, siguiendo el trabajo de Kossel y Weiss, sobre el efecto de los álcalis sobre las hidantoínas ópticamente activas, lo que le llevó a atribuir la alteración de la actividad óptica al cambio tautomérico.
Dakin previó la probabilidad de que ocurriera un cambio similar en las proteínas y en las cadenas polipeptídicas de las que estaban compuestas, cuando fueran expuestas al mismo tipo de tratamiento y dio razones para creer que esta transformación ceto-enol causaría la racemización de los aminoácidos internos de las cadenas peptídicas, mientras que aquellos que ocupaban las posiciones terminales en las cadenas polipeptídicas no sufrirían este cambio. En consecuencia, cuando diferentes proteínas, incluso aquellas que contienen los mismos aminoácidos en las mismas proporciones, fueron tratadas con álcali y luego hidrolizadas, los aminoácidos racemizados y aquellos que retienen su actividad óptica no debe ser idéntica.
Dakin y Dudley investigaron los aminoácidos producidos por la caseína tratada con álcali y Dudley, a su regreso a Inglaterra, extendió este trabajo a los caseinógenos de diferentes especies de animales y el trabajo se extendió más tarde a las diferentes globulinas, tanto del suero como de la leche. Pero quizás el resultado más sorprendente provino del trabajo de Dakin y Dale que estudiaron las albúminas cristalinas de los huevos de gallina y pato. Los experimentos de Dale mostraron que estos dos se comportan como antígenos distintos en la reacción anafiláctica, una reacción de inmunidad capaz de una diferenciación muy cercana y Dakin mostró que, después del tratamiento con álcali, las dos proteínas producían los mismos aminoácidos en las mismas proporciones pero con una distribución diferente.
Algunos años más tarde, su trabajo con las proteínas séricas del caballo, el burro y la mula, fue interrumpido por la desafortunada muerte temprana de Dudley. Dakin estaba muy interesado en estas proteínas tratadas con álcali. Se encontró que la neutralización de la mezcla alcalina producía sustancias que, superficialmente, eran muy parecidas a la proteína madre original, pero se demostró que en realidad eran muy diferentes.
No fueron absorbidos por ingestión; en inyección intravenosa se excreta rápidamente, aparentemente sin cambios, por el riñón y parecían ser bastante resistentes a las enzimas. Además, por sugerencia de Dakin, Ten Broeck examinó estas sustancias en busca de actividad antigénica y descubrió que también habían perdido esta propiedad. Aunque el trabajo de Dakin sobre los aminoácidos es probablemente más conocido, estos intentos de dilucidar la estructura de moléculas más grandes son típicos de su trabajo y pensamiento en esta época, cuando los métodos eran pocos y limitados en su aplicación.
Este tratamiento con álcali reveló diferencias, de hecho, en la estructura de las proteínas que, en ese momento, no podían demostrarse por ningún otro medio.
Dakin, como es bien sabido y a veces lamentado, tuvo pocos colaboradores y no estableció una escuela, pero la estrecha amistad personal y la comunidad de pensamiento e interés científico que se desarrolló entre Dakin y Dudley tuvo efectos de gran alcance. Dakin, que había sucedido a cargo del laboratorio de Herter y tenía una gran variedad de problemas entre manos, solicitó ayuda a su antiguo maestro, Cohen, para encontrar un asistente; y así se unieron Dakin y Dudley.
Su colaboración extraordinariamente fructífera y directa duró sólo dos años; pero pocas asociaciones de hombres de ciencia pueden haber sido tan provechosas y sus efectos se vieron mucho después de que Dudley dejara la escena activa. Juntos descubrieron la glioxalasa, una enzima que convierte los glioxales en sus ácidos correspondientes; informaron sobre la estabilidad de esta enzima, su inhibición, su distribución en la naturaleza y su diferenciación de enzimas de tipo similar. Se ocuparon del papel que desempeñan estas sustancias en el metabolismo; describieron un método general mediante el cual se pueden preparar rendimientos satisfactorios de cualquier glioxal deseado y resolvieron derivados inactivos de uraminoácidos mediante sus sales de estricnina.
Dakin y Dudley también demostraron que el conocido y muy utilizado método Kjeldahl para determinar el nitrógeno no siempre es aplicable a ciertos compuestos cíclicos, incluso después de un calentamiento prolongado, una valiosa contribución a la práctica analítica. Como se mencionó anteriormente, Dudley participó activamente en el trabajo sobre la racemización de proteínas.
Existen varios procedimientos, especialmente en el laboratorio del químico de proteínas, que deben su origen a Dakin. Ya se ha mencionado la introducción de peróxido de hidrógeno como agente oxidante y la aplicación de esta suave reacción a una gran variedad de sustancias simples y sus derivados.
En parte con el objeto de estudiar los productos de tal reacción, Dakin introdujo para-nitrofenilhidrazina como reactivo de laboratorio. Preparó una serie de hidrazonas a partir de sustancias puras de composición conocida, describió sus propiedades, solubilidad, forma cristalina y puntos de fusión. Otra importante contribución, especialmente a la técnica del químico de proteínas fue el descubrimiento del alcohol butílico húmedo para la separación cuantitativa de los ácidos monoamino monocarboxílicos.
Dakin elaboró y describió las mejores condiciones para la aplicación de este método, destacando el papel que desempeñó en su éxito el hecho de que el disolvente orgánico utilizado estaba saturado de agua.
Señala lo común que es un procedimiento de extracción de una sustancia con un solvente orgánico, señala que muchos solventes se saturan fácilmente con agua y plantea la pregunta de cuánto de la extracción se debe al uso de tales solventes miscibles en agua. Las ventajas de este método, usando el alcohol butílico en particular, fueron descritos en detalle por Dakin.
Se podría hacer un examen más completo de los productos de la hidrólisis de proteínas de lo que había sido posible hasta ahora; la hidrólisis de proteínas por enzimas podría seguirse más de cerca; una separación adicional de los aminoácidos extraídos podría efectuarse mediante otros disolventes; se hizo posible un mayor uso del polarímetro ya que los productos sufrieron poca racemización; se podrían extraer otras sustancias sensibles; y, dado que las extracciones se podían llevar a cabo a presión reducida, se hizo posible la extracción a temperatura reducida.
Con este método disponible, Dakin retomó la cuestión de la hidrólisis de la gelatina y aclaró la cuestión de la presencia de valina en la zeína. Fue en el curso de este trabajo que describió la producción de ácido hidroxi glutámico.
Los intentos posteriores de otros trabajadores de efectuar este aislamiento fracasaron y, además, las propiedades del producto sintético, preparado en ese momento y posteriormente, no fueron similares a las del producto de Dakin; de modo que se ha puesto en duda la existencia natural del ácido fthidroxi glutámico, y la opinión de los bioquímicos ahora es que no es un componente de las proteínas.
Es posible que Dakin hubiera obtenido una mezcla que los recursos del analista en ese momento no le permitieron resolver. El punto es digno de mención como la única ocasión en la que surgió una diferencia observacional entre Dakin y sus contemporáneos y sucesores. De hecho, es notable que haya contribuido tanto con tan poco error, y tan poco que retractarse, en una vida dedicada a una ciencia en rápido crecimiento.
Durante la Primera Guerra Mundial, Dakin, en sus visitas a Inglaterra, fue un invitado bienvenido en los laboratorios del Instituto Lister, donde los Departamentos de Investigación del Comité de Investigaciones Médicas —como se llamaba entonces— habían recibido alojamiento temporal. Allí, Dakin pudo renovar su amistad y asociación con Dale y otros de sus amigos ingleses, y allí conoció a George Barger y lo respetó como un compañero de trabajo que trabajaba en un tema difícil en un campo adyacente; a partir de ahí, Dakin y Barger publicaron un artículo juntos sobre derivados de glioxalina.
A partir de estos Laboratorios como base de acción, Dakin publicó algunos de sus resúmenes más importantes y llevó a cabo gran parte del trabajo que publicó durante la Primera Guerra Mundial en el British Medical Journal y el Biochemical Journal, y describió como hecho para el Comité de Investigación Médica. Varios de sus informes sobre desinfectantes, desinfección y esterilización de heridas se publicaron así al Comité de Investigación Médica, que se interesó especialmente por este aspecto del trabajo de Dakin.
Las visitas de Dakin al personal del Medical Research Council en su propio Instituto en Hampstead continuaron en los años siguientes y fueron muy apreciadas, al igual que su generosa donación de libros, que ayudó a establecer la biblioteca allí.
La experiencia de Dakin en la edición de artículos y la escritura de libros, que había ganado en gran parte con Cohen, fue de gran valor cuando Herter fundó la Revista de Química Biológica, y de la cual Dakin mismo se convirtió en editor de una tiempo. Los jóvenes y contemporáneos de Dakin le están agradecidos por su ayuda y amabilidad en los primeros años; pero su continuo interés y trabajo para el Journal of Biological Chemistry puso en deuda a todo el mundo de la bioquímica.
Herter mantuvo un interés activo en el Journal durante su vida y Dakin le fue muy fiel: publicó más de ochenta artículos en él. Después de la muerte del Dr. Herter, en 1910, la Revista fue editada por cuatro científicos distinguidos, de los cuales Dakin fue uno, hasta 1930.
La famosa revista ahora es editada por un comité de expertos y ha logrado una circulación y reputación en todo el mundo. La llegada de un nuevo número de 'J.B.C.' es todavía una especie de evento y el nombre de Christian Herter todavía se conmemora en la portada; pocos lectores de la Revista, sin embargo, conocen la estrecha asociación de Dakin con ella, ni cuánto se le debe por cuidarla en sus primeros años.
En los últimos años de su actividad de laboratorio Dakin se interesó por el aislamiento del factor hematopoyético presente en el hígado, un trabajo y una búsqueda, a la que entregó todos sus conocimientos, experiencia y destreza. En este trabajo se le unió Randolph West y, aunque fallaron en su objetivo principal como muchos otros lo han hecho antes y después; y es sólo muy recientemente que el principio activo en la anemia perniciosa se ha aislado y, aún así, no se ha caracterizado por completo, el trabajo de Dakin y West no carecía de valor.
De ahí surgió un método para preparar el factor hematopoyético activo en el hígado en un estado de pureza superior al anterior. Dakin llegó a Inglaterra en 1935 y supervisó la preparación, a escala de fabricación, del principio hepático hematopoyético por una empresa británica. Estaba muy interesado y muy impresionado por los ensayos clínicos de estos preparados, instituidos y llevados a cabo bajo la égida del Consejo de Investigaciones Médicas.
En el campo de la terapia hepática, se sigue reconociendo que Dakin ha realizado una contribución importante en el refinamiento de los extractos de hígado, lo que les permitió, en una etapa temprana de su historia, ser utilizados por vía parenteral con seguridad. No hay duda de que las decepciones que se repitieron en la búsqueda del principio activo fueron un duro impuesto sobre la fuerza de Dakin.
Dakin se convirtió en Master, y luego en 1909, Doctor en Ciencias de su antigua Universidad, y en 1936 fue elegido Doctor honoris causa en Derecho.
Fue igualmente honrado, con la concesión de títulos honoríficos, por Yale en 1918 y por Heidelberg en 1938. En reconocimiento a su trabajo en Francia y por su trabajo en infecciones de heridas, el Gobierno de Francia lo nombró miembro de la Legión de Honor.
El Club de Químicos de Nueva York le otorgó la Medalla Conne en reconocimiento a sus contribuciones a la química y la medicina, y ha sido miembro de la Sociedad Química desde 1901 y se convirtió en miembro del Instituto de Química en 1904.
Fue miembro de la Sociedad Americana de Químicos Biológicos. Hacia el final de su vida se convirtió en miembro de la Junta de Asesores Científicos del Instituto Merck de Investigación Terapéutica, lo que le proporcionó nuevos intereses y muchos amigos tanto en Estados Unidos como en Inglaterra. Se convirtió en director de la firma Merck & Co.
Fue elegido miembro de la Beca de la Royal Society en 1917 y en 1941 fue el medallista de Davy.
Dakin era un trabajador solitario, y con frecuencia se lamenta, y sobre todo por los pocos que tuvieron el privilegio de trabajar con él en el laboratorio, que no dirigiera ningún equipo ni fundara ninguna escuela. Quizás, cuando se considera el muy corto período que él y Dudley estuvieron asociados, y la gran cantidad de trabajo que hicieron, se lamenta más que nunca que este tipo de contacto no se haya extendido más ampliamente. Pero tal vez se pueda encontrar una explicación en las circunstancias que rodearon el traslado de Dakin a Herter y en los rasgos inherentes al carácter de Dakin.
La reunión de Dakin con Herter se debió al Dr. C. J. Martin, F.R.S., quien fue Director del Instituto Lister en 1904 cuando Herter estaba buscando a alguien que lo ayudara en Nueva York; Martin ha sido criticado negativamente por aconsejar a Dakin que aceptara la oferta de Herter pero, como señala Martin, no había otro puesto adecuado para ofrecerle a Dakin en ese momento; se había ganado el respeto de muchos hombres de ciencia por la calidad de su mente y su aptitud química. Además, Dakin era un hombre delicado y su director en ese momento dudaba de si resistiría la lucha y la confusión de la vida académica. A esto hay que añadir la timidez inherente a Dakin y su disgusto por la publicidad de cualquier tipo. Esta característica creció con los años y las cuentas, en algunos medida, por la circunstancia de que era tan poco conocido por los bioquímicos más jóvenes, ya que esta misma timidez le impedía asistir a congresos internacionales y encuentros similares.
Surge la pregunta de si se habría ganado más para la bioquímica si la personalidad de Dakin se hubiera desarrollado, digamos, en la atmósfera académica que rodea una silla en lugar de la reclusión del laboratorio al que dedicó la mayor parte de su vida.
Dakin era un bioquímico en activo, un verdadero artesano al que le encantaba trabajar en su banco y usar sus propias manos para tareas que de otro modo habrían sido realizadas por otros: no suponían ninguna dificultad para Dakin. Prefería este tipo de trabajo a liderar un equipo de trabajadores, y es de lamentar que este aspecto de su naturaleza no se haya difundido más ampliamente.
La influencia de Dakin en la bioquímica ha sido de dos tipos: ha existido la influencia que ha ejercido a través de sus amistades personales con colegas científicos, y esto fue algo restringido; y ha habido sus propias contribuciones a la ciencia de la bioquímica como se registra en sus trabajos publicados. Todos están de acuerdo en que Dakin hizo muchas contribuciones importantes en las que se basa nuestro conocimiento actual; su trabajo fue verdaderamente el de un gran pionero.
Sir Henry Dale escribe lo siguiente: "Por lo que se ha dicho, quedará claro que durante todas las fases principales de su carrera, Dakin fue un trabajador individual, que llevó a cabo sus investigaciones en un aislamiento inusual de la corriente principal de tales actividades...Quizás esta preferencia por la investigación aislada y en gran parte por sí sola, se hizo más fuerte en él con los años; o tal vez sólo se hizo más notorio, en contraste con una adopción cada vez más generalizada en el mismo período, en bioquímica no menos que en otros departamentos de ciencia, de la colaboración organizada y el trabajo en equipo".
En cualquier caso, la negativa de Dakin a dejarse engañar de esta preciada intimidad, a cualquiera de las posiciones de influencia más directa que debían haber estado abiertas para él, no implicaba en él ningún rastro de una actitud reservada o posesiva con respecto a sus propios actos o descubrimientos. Ningún hombre podría haber estado más ansioso, de hecho, por la discusión personal de sus experiencias y sus proyectos con hombres de intereses similares.
Tenía un don extraordinario para exponer sus ideas de antemano y dejar que otros compartieran su interés en ellas, pero solo a través de contactos personales y privados, o correspondencia, con amigos agradables. De hecho, de vez en cuando, participaba en una colaboración más sistemática con uno u otro, y tenía colegas que trabajaban con él en su laboratorio, aunque no por períodos prolongados, ni más de uno a la vez.
Su asociación más fructífera de este tipo fue probablemente la de H. W. Dudley, en el período de Madison Avenue.
Aproximadamente en 1935 aceptó, y continuó disfrutando enormemente hasta los últimos años de su vida, una oportunidad especial de contactos más regulares con las empresas de investigación y el personal de investigación de la conocida casa farmacéutica de GW Merck & Co., habiendo a tal efecto, a petición personal del Sr. Merck, conseguido ser director científico honorario de la firma.
Después de la muerte de Dakin, unos setenta y cuatro de los que lo habían conocido y admirado pudieron reunirse, con las hijas de la Sra. Dakin, en la Iglesia Presbiteriana de Brick, Park Avenue, Nueva York. Y allí, con lecturas del Ministro de la Biblia, de Platón y de los escritos de Louis Pasteur, y con la música de Bach que tanto habían amado Dakin y su esposa, conmemoraron en honor y cariño al gran hombre que había sido su amigo y su vida de devoción al avance del conocimiento natural.
Una nota especial de agradecimiento a Sir Henry Dale, O.M., Dr. F. H. Carr y Dr. Hans Clarke, y Profesores F. C. Happold y A. Wormall.
Percival Hartley - Royal Society
